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【產品介紹】
本試劑盒是用來從葉子、種子等植物組織和植物培養細胞等植物樣品中快速提取和純化植物基因組DNA。本試劑盒是利用磁硅珠能吸附破碎溶液中的基因組DNA 的原理來回收DNA。無需借助苯酚等有害的試劑來進行除蛋白操作，就能簡便地抽提出基因組DNA。回收的DNA 可以直接用于下游進行酶切、PCR、二代測序和基因芯片等分子生物學實驗。本試劑盒除可與核酸自動抽提裝置組合使用外，還可與磁分離架一起使用，作為進行固液手動分離的試劑盒。
【特點】
l 高效率：可以從葉子、種子等組織和培養細胞等植物樣品中抽提出高純度的基因組DNA。
l 簡便/短時間：利用磁硅珠對基因組DNA 的吸附性，能簡便地在短時間內抽提出基因組DNA。
l 可進行高純度的DNA 抽提： 本試劑盒抽提的基因組DNA，幾乎不含RNA 和蛋白質等雜質，可直接用于PCR 等的酶反應。
【保存方法及注意事項】
1) 裂解液低溫儲存可能會出現白色絮狀漂浮物，在使用前65℃預熱至白色絮狀物完全溶解，不影響使用效果。
2）磁珠使用前要充分混勻。
3）如果下游實驗對RNA污染比較敏感，可在裂解時加入1ul 的RNaseA （10mg/ml）。
4）如果是干材料，適當延長裂解時間，種子用粉碎機打成粉末狀使用，樣品為種子時，裂解時間為30min。
5）如果同等取樣量下欲得到更多DNA可增加洗脫次數（洗脫次數最好不要超過3次），也可適當延長裂解時間。
【試劑盒組成】
組分
100次
保存
Lysis Buffer
50 ml
常溫
PuriMag bead
2 ml
2-8℃
Wash buffer
75%乙醇（用戶自備）
Elution buffer
5 ml
RNase A
2 ml（選配試劑）
異丙醇
用戶自備
DNA濃度及純度檢測 ：（1）得到的基因組DNA片段大小與樣品保存時間、操作過程中剪切力等因素有關，所得DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度和純度。 （2）DNA應在OD260處有顯著吸收峰，OD260=1相當于大約50ng/ul雙鏈DNA，40ng/ul單鏈DNA。OD260/OD280比值應為1.7~1.9，如果洗脫時使用去離子水，比值會偏低，因為pH和離子會影響吸光度，并不表示純度低。
【操作步驟】
取材量參考下面表格：
材料
取樣量
新鮮植物葉片
50～200 mg
干葉片
10～30 mg
大豆種子
5～30 mg
小麥種子
玉米種子
以從50 mg～200 mg植物葉片中提取基因組DNA為例：
1）取新鮮植物組織或粉狀干燥組織50mg～200mg,用液氮在研缽中研磨充分，加入1ml的Lysis Buffer（65℃預熱）研磨均勻，然后轉移到1.5ml的EP管，混合均勻。
2）將EP管置于恒溫水箱中65℃溫浴30～60min，期間不時搖動，溫浴結束后，12000rpm離心10min。
3）取200ul上清液于新的1.5ml的EP管中，加入20ul 的RNA酶混勻，5min后加入20ul的 PuriMag bead、200ul異丙醇，顛倒混勻靜置5min后,將EP管置于磁力架上磁分離，吸棄上清液。
4）移去磁力架，加入800ul的Wash Buffer，振蕩混勻靜置5min后，將EP管置于磁力架上磁分離，吸棄上清液。若有團狀或絲狀物可增加振蕩時間及力度。重復該步驟一次。
5）移去磁力架，加入100ul的Elution Buffer，移液槍緩慢吹打混勻1~2min，將離心管在磁力架上靜置0.5min，小心吸走上清液放入新離心管即為提取的DNA，存放于2-8℃，長期存放需置于-20℃。（洗脫液在65-70 ℃中預熱后洗脫效果更好，減小洗脫體積或多次洗脫可增大DNA濃度。）
【常見問題即處理建議】
常見問題
可能的原因
建議
得率
樣品沒有研磨充分
盡量將樣品研磨充分
樣品裂解完后，沒有離心直接進行下一步操作
如樣品裂解后，一定要離心后，再進行下一步操作。
樣品用量過大
嚴格按說明書程序進行
程序設置不準確
條帶彌散
研磨時間太長
迅速研磨防止DNA降解
環境溫度太高
可將研缽置于-20℃預冷20min后再進行研磨，如所提材料基因組極易降解，用液氮研磨
樣品不新鮮或樣品反復凍融多次
盡量用新鮮樣品試驗
裂解時間太長
裂解時間不超過60min
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