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一、概述
兒茶酚胺( CAs)類物質由腎上腺髓質、交感神經、副神經節的嗜鉻細胞合成和分泌的單胺類神經遞質，是具有較強的生理學活性的內源性物質， 在大腦和神經信號傳導中起著重要的作用。兒茶酚胺包括多巴胺（dopamine，DA）、去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）和腎上腺素（epinephrine，E），一般稱為兒茶酚胺原型物質，是存在于中樞和外周的神經遞質或激素，可作為多種神經內分泌和心血管疾病的篩查、診斷、治療和預后的重要生物標志物。兒茶酚胺代謝物主要包括甲氧基腎上腺素（metanephrine，MN）、甲氧基去甲腎上腺素（normetanephrine，NMN）、3-甲氧基酪胺（3-methoxytyramine，3-MT）、高香草酸（homovanillic acid，HVA）和香草扁桃酸（vanillylmandelic acid，VMA），其與兒茶酚胺原型物質聯合測量時，可提供疾病發展和治療效果的個性化信息。
兒茶酚胺及代謝產物濃度測定是嗜鉻細胞瘤和副神經節瘤的重要篩查手段，液相色譜串聯質譜（LC-MS/MS）方法是國內外指南推薦的檢測方法，可同時對兒茶酚胺6種代謝產物進行定量（如表1），檢測限可達到pg級別。但是血液和尿液中的兒茶酚胺及代謝產物濃度極低，需要對樣本中的待測物進行固相萃取，方可進行檢測。
本試劑盒所含磁珠是根據兒茶酚胺及代謝產物等電點和極性分布的特點而專門設計的疏水弱陽離子平衡磁珠（PuriMag HLB-WCX），用于樣本中兒茶酚胺及代謝產物的特異性吸附，且具有高比表面積、高懸浮、快速磁分離的特點，特別適合大量樣本的快速前處理。
表1 兒茶酚胺代謝產物檢測項目和參考范圍
項目
縮寫
CAS
pKa
LogP*
參考范圍ng/ml
腎上腺素
E
51-43-4
9.69
-0.43
<0.111
去甲腎上腺素
NE
138-65-8
9.50
-0.68
0.07-0.75
多巴胺
DA
51-61-6
10.01
0.030
<0.03
甲氧基腎上腺素
MN
5001-33-2
10.05
-6.81E-04
<0.099
甲氧基去甲腎上腺素
NMN
97-31-4
9.99
-0.39
<0.165
3-甲氧酪胺
3-MT
554-92-9
10.39
0.53
<0.022
二、樣品前處理方法
（1）試劑配制
內標工作液：含有40 ng/mL甲氧基腎上腺素?d3 (MN?d3)、 40 ng/mL甲氧基去甲腎上腺素?d3 (NMN?d3)、40 ng/mL 3?甲氧酪胺?d4 (3?MT?d4)的0 .1 M的鹽酸水溶液。
淋洗液：甲醇或乙腈。
洗脫液：體積比為2:98的甲酸/乙腈混合液(且含10μg/mL的維生素C)。
（2）樣品處理流程
步驟1→磁珠的預處理：上下顛倒磁珠懸浮液，混合均勻后取 20 μL磁懸液到1 .5mL離心管中，加入200ul甲醇渦旋振蕩30S分散磁珠，磁分離，去除甲醇。加入200 μL純水。
步驟2→樣本的磁固相萃取：取20μL內標工作液和400μL樣本加入上述含200μL磁懸液的1 .5mL離心管中，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，去除上清液。
步驟3→淋洗：加入200μL純水，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，去除上清液。 加入200μL甲醇，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，去除上清液。
步驟4→洗脫：加入100μL洗脫液，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，取上清液上機檢測。
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