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更新：2025-3-17 21:30:15??????點擊：

產品介紹

采用特殊設計的磁性顆粒高效還原蛋白質、多肽及其他含二硫鍵分子的二硫鍵。TCEP（三(2-羧乙基)膦）磁性顆粒可避免傳統離心柱或重力流柱分離還原樣品與還原劑的耗時操作。

固定化 TCEP 磁珠的核心優勢

快速分離：通過磁珠固定 TCEP，可快速從反應體系中移除還原劑，減少下游實驗干擾。

理化特性：TCEP 作為一種水溶性、無味、無毒且高度穩定的蛋白質還原劑，是替代 β-巰基乙醇和 DTT（二硫蘇糖醇）的理想選擇。其優勢在于：

產品特性

基團密度：25~40 微摩爾/克磁珠
顆粒形態：超順磁性微球
粒徑：標稱直徑 0.2 微米
儲存條件：
- 保存于 20% 乙醇、1 mM EDTA 溶液中（濃度 10 mg/mL），2~8°C 避光儲存，禁止冷凍
- 運輸溫度：常溫（短期運輸不影響活性）
- 有效期：妥善儲存及操作條件下，保質期 1 年

操作要點

反應適用性
- pH 范圍：pH 4.0-9.0（廣譜兼容）
- 溫度范圍：5-95°C（適用于多數溫控策略）
變性劑使用規范
- 常規推薦：大多數蛋白質無需變性劑即可有效還原
- 深層處理建議：對于含內部二硫鍵的復雜結構，可添加 6M 鹽酸胍暴露隱藏位點以確保完全還原
- 禁用說明：避免使用尿素，因其生成的氰酸鹽會與巰基發生副反應
離子干擾控制
- 還原緩沖液中需添加 5-20 mM EDTA，以螯合 Zn2?、Cu2?、Mg2? 等二價金屬離子，防止巰基再氧化
樣品處理時效性
- 還原后的樣品應立即使用，避免二硫鍵重新形成

標準操作流程（示例）
注：建議通過預實驗優化磁珠用量（可根據需求按比例擴增或縮減體系）

緩沖液配制

操作步驟
A. 磁珠預處理

懸浮磁珠：取適量磁珠，用超純水配制 50 mg/mL 懸浮液
關鍵提示：
- 現配現用效果最佳，4°C 短期儲存不超過 1 周（活性無顯著衰減）
混懸磁珠：使用前渦旋振蕩或搖勻至磁珠完全分散
注意：磁珠靜置后需在 2 分鐘內分裝使用，防止沉降

B. 樣品處理

轉移磁珠：將所需量的磁性顆粒轉移至離心管
注：需根據實驗體系優化磁珠用量，典型配比為：
- 磁珠用量：30-50μl（對應3-5mg磁珠）
- 樣品體積：30-50μl（含50-80μg蛋白/多肽）
磁場分離：將離心管置于磁力架上靜置1-3分鐘，待上清澄清后，趁管身仍在磁架上移除上清
樣品混合：
- 輕柔混勻法：用移液器反復吹打25次（約1分鐘）
- 快速混勻法：渦旋振蕩5分鐘（2000 rpm）
還原反應：室溫下端對端旋轉孵育1小時
產物分離：再次將管置于磁力架1-3分鐘，磁吸狀態下將上清轉移至新管

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（討論生物磁珠研發、生產、應用過程中的問題）

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